طريقة اجراء اختبار كومبس

تعد الاختبارات الطبية القائمة على تحليل مكونات الدم وكيميائه أحد أهم العوامل المساعدة في اكتشاف وتشخيص مختلف الأمراض وتحديد العلاج المناسب لكل مريض بشكل صحيح، وتعتمد العديد من أنواع التحاليل الطبية على دراسة طبيعة وشكل مكونات الدم مسبقا، ثم ملاحظة أي تغيرات تطرأ عليها، ومن بين هذه الاختبارات الهامة اختبار كومبس أو اختبار كومبس تست .

اختبار كومبس

يُعرف اختبار كومبس باللغة الإنجليزية باسم Coombs Test وفي المراجع العلمية والطبية يُشار إلى هذا الاختبار باسم Anti-globuline test واختصارًا باسم AGT ، ويوجد نوعين من هذا الاختبار أحدهما مباشر ويُرمز له بـ DAT والاخر غير مباشر ويُرمز له بـ IAT ، وقد أخذ الاختبار اسم كومبس تست نسبة إلى اسم العالم الذي قد تمكن من اكتشافه منذ عام 1945م .

يعتبر اختبار كومبس Coombs Test فعالا في الكشف عن الأجسام المضادة igG الظاهرة على سطح كريات الدم الحمراء، والتي تنتج نتيجة رد فعل مناعي في الحالات المكتسبة للمناعة وليست الطبيعية. ويمكن اكتشاف تلك الأجسام المضادة في مصل الدم أو على سطح كريات الدم الحمراء، ولذلك يتم إجراء اختبار كومبس للتأكد من وجود تلك المستضدات على خلايا الدم الحمراء أو اكتشافها في مصل الدم .

فكرة اختبار كومبس

في حالة المناعة المكتسبة، يقوم الجسم بإنتاج أجسام مضادة تهاجم كرات الدم الحمراء ، وتحتوي هذه الأجسام سواء في المصل (السيرم) أو على سطح كرات الدم الحمراء من نوع IgG وهي جزيئات مناعية صغيرة جدا لا يمكنها ربط كرات الدم الحمراء بعضها ببعض ، ولذلك لا يمكن اكتشاف وجودها بسهولة. ولذلك يتم اختبار كومبس عن طريق إضافة بعض الجزيئات ذات الحجم الأكبر والتي يمكنها ربط كرات الدم الحمراء ببعضها مما يؤدي إلى حدوث تراص ، وفي هذه الحالة يكون اختبار كومبس إيجابيا .

يعود سبب وجود أضداد على كريات الدم الحمراء إلى عدة أسباب، منها:

– في حالات إصابة فقر الدم التحللي الناتج عن أحد أمراض المناعة الذاتية .

– في حالات الأم التي تحمل فصيلة دم سالبة لعامل ريسس RH Negative وفصيلة دم الجنين موجبة لعامل ريسس RH Positive ، يحدث تنقل بعض كرات الدم الحمراء المحملة بعامل ريسس من دم الجنين إلى دم الأم عبر التبادل الدموي عبر المشيمة ، مما يؤدي إلى تكوين بعض المستضدات ضد عامل ريسس ووصول بعضها إلى دم الجنين بصورة igG وقد ينتج عن ذلك تلف كرات الدم الحمراء للطفل بعد الولادة ، وفي بعض الأحيان يمكن أن يكون الجنين ميتا .

في بعض الأحيان يتم تشكيل بعض الأجسام المضادة ضد كرات الدم الحمراء في الجسم دون وجود سبب واضح، وفي هذه الحالة يكون اختبار كومبس إيجابيًا أيضًا .

-الإصابة ببعض الميكروبات التي تحمل أنتيجينات (أجسام ممرضة) مشابهة تمامًا للأنتيجينات الموجودة على سطح كرات الدم الحمراء وهذا يؤدي أيضًا إلى أن الأجسام المضادة التي تنتج من أجل مهاجمة هذا الميكروب تهاجم أيضًا كرات الدم الحمراء ويحدث التحلل الدموي والأنيميا التكسيرية للمريض .

أنواع اختبار كومبس

تنقسم اختبار كومبس إلى أكثر من نوع وفقًا للطريقة المستخدمة في إجرائه

اختبار كومبس المباشر

في حالة اختبار كومبس المباشر Direct Coombs Test ؛ يتم استخدام الدم الكامل للمريض (كرات دم على سطحها المستضد IgG) ، ويتم إضافة مصل كومبس الذي يحتوي على مستضدات IgM كبيرة الحجم ، وبالتالي يحدث تراص (تلزن) ويكون التحليل هنا إيجابي ، ويتم الاعتماد على تحليل كومبس تست المباشر في الحالات التالية :

يتم الكشف عن المستضدات IgG على كرات الدم والبروتينات المتممة الموجودة على سطح الكريات الحمراء .

يتم كشف وجود فقر الدم الانحلالي المناعي (Hemolytic Anemia) .

يُمكن كشف حدوث رد فعل مناعي يؤثر سلبيًا على الكريات الحمراء ويُسبب انحلالها، مثلما يحدث في أمراض المناعة الذاتية مثل مرض الذئبة الحمامية الجهازية (Systemic Lupus Erythematosus) .

يتم الكشف أيضًا عن الأمراض التي تنتج عن رد فعل المناعة alloimmunity البسيط، والذي يحدث نتيجة اختلاف زمرة الدم بين الأم والجنين، ويؤدي إلى تلف كريات الدم الحمراء لدى الأطفال الرضع الجدد .

يستخدم هذا الاختبار المباشر من تحاليل كومبس للتثبت من تأثير الأدوية التي تؤدي إلى تحفيز جهاز المناعة والمناعة الذاتية في الجسم وتأثيرها على خلايا الدم الحمراء، ومن بين تلك الأدوية البنسلين وبعض أدوية القلب مثل دواء كينيدين (Quinidine) .

اختبار كومبس غير المباشر

يعتمد اختبار كومبس غير المباشر (Indirect Coombs test) على استخدام مصل الدم من المريض الذي يحتوي على أضداد IgG، ويتم إضافة دم إليه حتى ترتبط الأضداد بكرات الدم، ثم يتم إضافة مصل كومبس الذي يحتوي على أضداد IgG. إذا حدث تراص أو تلزن في العينة، يكون الاختبار إيجابيا، ويستخدم هذا الاختبار للكشف عن الحالات المرضية التالية

– تم الكشف عن وجود تركيز قليل من مستضدات IgG العائمة في مصل الدم وغير المرتبطة بسطح الكريات الحمراء .

يتم إجراء الاختبار قبل إجراء عمليات نقل الدم .

يستخدم في حالات الحمل وبعد الولادة إذا كانت فصيلة دم الأم وعامل ريسس لديها مختلفة عن فصيلة دم الجنين .

احتياطات إجراء اختبار كومبس

هناك بعض الاحتياطات التي يجب مراعاتها عند إجراء اختبار كومبس تست، مثل: –

يمكن إجراء هذا التحليل في أي وقت من اليوم، لأنه لا يتطلب الصيام .

الأنبوبة التي تستخدم لسحب عينة دم وريدي من المريض للقيام بتحليل الكومبس المباشر، تكون من نوع الأنابيب التي تحتوي على مانع تجلط من نوع إديتا EDTA، وذلك في الغالب من الأنابيب ذات الغطاء الأرجواني .

تستخدم الأنابيب ذات الغطاء الأحمر أو الأصفر (التي تحتوي على جل) عند سحب عينة دم وريدية من المريض عند الرغبة في إجراء اختبار كومبس غير المباشر، حيث أن العينة هنا لا تتطلب وجود مانع تجلط لأن التحليل يعتمد على استخدام مصل الدم .

يتم التعبير عن نتيجة التحليل بمصطلح إيجابي أو سلبي. إذا أعطي الدم تلزن سواء في حالة كومبس المباشر أو غير المباشر، يتم كتابة النتيجة إيجابية. أما إذا لم يحدث تلزن، يتم تسجيل النتيجة سلبية. وإذا أراد الطبيب نسبة محددة في حالة العينة الإيجابية، يتم إجراء تخفيفات وتحديد النسبة الدقيقة للمستضدات في دم المري .

يتم الاعتماد على تحليل كومبس المباشر في حالة حديثي الولادة، وفي فترة الحمل يتم الاعتماد بشكل أكبر على تحليل كومبس غير مباشر، وتحدد طريقة التحليل المناسبة وفقًا لتقييم الطبيب للحالة المرضية ورؤيته الشخصية .